Pigro News

Transgeniczne świnie przetestowane pod kątem zatrzymania replikacji wirusa ASF

  2020-05-14 14:56:23

  zagraniczne

Transgeniczne świnie przetestowane pod kątem zatrzymania replikacji wirusa ASF
Transgeniczne świnie przetestowane pod kątem zatrzymania replikacji wirusa ASF
Wkrótce rozpoczną się w Niemczech próby obserwowania postępu w transgenicznych świniach z komórkami odpornościowymi wykazującymi oporność na ASFv.
Pierwotnie w maju zaplanowano testy na świnie pod kątem odporności na ASF, poprzez poddanie ich infekcji wirulentnym ASFv. Prace zostały teraz przełożone na czerwiec ze względu na skutki pandemii Covid-19.
Szczepionki i środki przeciwwirusowe
Ponieważ afrykański pomór świń (ASF) nadal infekuje populacje świń i knurów w Afryce, Azji i Europie, opracowywanych jest kilka szczepionek i środków przeciwwirusowych w celu zwalczania wirusa lub całkowitego jego zniszczenia.
Dr Björn Petersen i jego koledzy z Friedrich-Loeffler-Institut, niemieckiego Federalnego Instytutu Badań Zdrowia Zwierząt, przyjęli inne podejście. Opierają się na badaniach, które wykazały, że możliwe jest generowanie organizmów żywicieli (w tym przypadku świń) odpornych na ataki wirusowe dzięki zastosowaniu edycji genów.
Receptory wirusa w komórkach gospodarza
Wcześniejsze edycje obejmowały albo wyeliminowanie genów związanych z receptorami wirusowymi w komórkach gospodarza (brak receptora w komórce, brak możliwości przyłączenia się i wejścia wirusa) lub umożliwienie gospodarzowi walki z wirusem poprzez produkcję przeciwwirusowego „przewodnika” RNA. W tym drugim scenariuszu wirus dostaje się do komórki, ale „przewodnik” RNA zapobiega replikacji wirusa lub jego „potomstwu” do innych komórek.
Narzędzie do edycji genów CRISPR / Cas9
Przyglądając się bliżej tym badaniom z przeszłości, narzędzie do edycji genów CRISPR / Cas9 zostało z powodzeniem zastosowane w warunkach laboratoryjnych w celu uczynienia komórek odpornymi na zakażenie ludzkim wirusem niedoboru odporności (HIV) i uczynienia rzeczywistych świń odpornymi na wirusa odpowiedzialnego za świnie Zespół rozrodczo-oddechowy (PRRSv). Petersen wyjaśnił, że w tych próbach komórki ludzkie stały się oporne na HIV poprzez usunięcie ich powierzchniowych receptorów odpornościowych „T”, do których HIV musi się przyłączyć. Podobnie jest ze świniami odpornymi na PRRSv, ale z komórkami odpornościowymi zwanymi makrofagami.
Szczegóły edycji genu ASFv
Korzystając z CRISPR / Cas9, Petersen i jego zespół zastosowali konstrukt genetyczny z bakterii do płodowych komórek świń zwanych fibroblastami (najczęstszymi komórkami tkanki łącznej u zwierząt). Ta edycja zaowocowała genetycznymi „nożycami”, które tną istotne części genomu wirusowego, a zatem niszczy go. Komórki testowano, aby sprawdzić, czy geny bakterii ulegają ekspresji w stabilny sposób i rzeczywiście replikacja ASFv została zahamowana. Petersen powiedział: „Odkryliśmy, że ekspresja przeciwwirusowego przewodnika RNA prowadzi do około 10 000-krotnego zmniejszenia replikacji wirusa w przypadku szczepu ASF„ Armenia ”.” I chociaż szczep ASF „Kenia” był początkowo odporny na „cięcia nożycowe”, zespół wygenerował następnie nowe wektory, które wyrażają kilka przewodnich RNA, które dotyczą wszystkich odpowiednich szczepów ASFv.
Fibroblasty zostały następnie sklonowane, aby wygenerować żywe potomstwo. Makrofagi w próbkach krwi od tych świń prowokowano ASFv i odnotowano obniżone poziomy replikacji ASFv.
Hamowanie replikacji wirusa ASF
Konieczne są dalsze badania, aby potwierdzić, że ten „przewodnik” przeciwwirusowy RNA specyficznie i skutecznie hamuje replikację wirusa oraz czy pokrewne linie komórkowe są odporne na wszystkie naturalne warianty ASFv. Petersen zauważył: „Jednoczesne ukierunkowanie dodatkowych genów wirusa przez ten przeciwwirusowy system RNA może dodatkowo zwiększyć jego skuteczność, w szczególności przeciwko wielu szczepom i izolatom ASFv. Aby to osiągnąć, rozpoczęliśmy adaptację multipleksowego systemu wektorowego CRISPR / Cas9. W przyszłości system CRISPR / Cas9 powinien również ułatwiać ukierunkowane usuwanie innych genów w ASFv, a takie formy wirusa mogą pomóc w zrozumieniu funkcji różnych genów i mogą być również odpowiednie jako żywe szczepionki atenuowane lub jednokrotnie cyklowe.”
Strategię tę można również dostosować do użycia z innymi wirusami, dla których trudno jest opracować szczepionki lub leczenie, a także opracowywać nowe leki.
Edycja genów jest drażliwą kwestią w Unii Europejskiej. Potomstwo zwierząt poddanych edycji genowej jest uważane za organizmy zmodyfikowane genetycznie w UE, dlatego zwierzęta te nie mogą być wykorzystywane do produkcji komercyjnej. Jednak do celów badawczych dozwolona jest edycja genów.